诊断学第七版教材

记为CDl9＋／c七）56一，而多发性骨髓瘤细胞通过为CDl9／C【）56。。。使用流式细胞仪对外周
血或骨髓标本进行多参数分析，并计算浆细胞含量，对于多发性骨髓瘤的诊断和治疗评估
有重要意义。
　　　　用FcM检测阵发性睡眠性血红蛋白尿患者血细胞细胞膜上的CD55、C【）59已能从病
理上提供直接的证据，比传统的溶血试验具有更高的特异性和灵敏度。
　　　　用FCM检测红细胞、粒细胞抗体及血小板表面的相关抗体，对确诊自身免疫性贫血、
粒细胞减少症及血小板减少性疾病，具有检测速度快、灵敏度高、特异性好的优点。
　　　　（三）肿瘤学
　　　　流式细胞术可用于测定实体瘤标本、穿刺标本、胸腹腔液体、膀胱冲洗液、尿液、食
管镜及支气管镜钳取的少量活检组织等中肿瘤细胞的DNA倍体、解析细胞周期，通过肿
瘤细胞异倍体测定，鉴别良恶性肿瘤，预测各种癌的预后，并能对化疗药物的选择、放疗
的强度及时间的决定等起主要作用。
　　　　根据细胞周期分析结果，适当选用周期特异性药物或非周期特异性药物，可协助拟定
治疗方案；根据化疗过程中肿瘤细胞DNA倍体直方图的变化，可了解细胞动力学变化，
以此评估药物疗效。
　　　　肿瘤化疗的失败在很大程度上是由于肿瘤细胞对化疗药物产生了耐药，故肿瘤细胞耐药
机制的研究具有重要的意义。但耐药的形成过程很多，如药物吸收减少、细胞解毒作用增
强、靶分子改变、DNA损伤修复能力增强、细胞内药物溢出增多、细胞凋亡的抑制等。多
药耐药基因编码的P糖蛋白，是白血病细胞及肿瘤细胞抗药性的分子学基础，也是影响化疗
疗效的主要障碍。利用FcM检测多药耐药基因（MDR），可为药理学研究提供一定的依据。、
　　　　（四）分子生物学
　　　　流式细胞技术可在单细胞水平进行基因的表达、调控及功能等研究。如近年发展起来
的流式分子表型分析（molec：ular　phenotyping），该技术是指用流式细胞技术检测细胞中特
异性核酸序列或特异性基因异常。流式分子表型分析与免疫表型分析技术相结合，为检测
所选择细胞亚群的特异性核酸序列（如癌基因、病毒核酸等），提供了一种非常有用的工
具，具有广阔的应用前景。
　　　　随着流式细胞技术及其相关技术的不断发展，相信其将会有更广泛的应用。
第三节染色体检测
燃黪｜攀麟｜溅絮号
一、染色体检查的方法
　　　　染色体检查又称染色体核型分析。该方法是将特定的细胞短期或长期培养后，经过特
殊制片和显带技术，在光学显微镜下观察分裂中期的染色体，确定染色体的数目及结构是
否发生畸变，是确诊染色体病的基本方法。染色体检查的标本除常用外周血外还可以用骨
髓细胞、皮肤和羊水等。在染色体检查中，除常规染色体检查技术外，各种显带及其他分
子生物学技术用于不同的检查目的。染色体检查常用的分子生物学检查方法有原位杂交、
DNA限制性片段长度多态性分析（restriction　fragment　length　polymorplaism，RFLP）、聚
合酶链反应（p01yme！。ase　chain　reaction，PCR）等。
二、染色体异常及染色体病
　　　　染色体异常包括染色体数目异常和结构异常。常见的疾病中慢性髓性白血病95％以上
具有费氏染色体（Ph），该染色体是22号染色体长臂和9号染色体短臂相互转位而成。除
此以外还有其他常染色体和性染色体异常（表4—10—1）。
表4．10．1主要染色体异常
三、XYY综合征染色体检查
　　　　XYY综合征又名YY综合征，患者具有47条染色体，比正常男性多一条性染色体为
Y，即性染色体为xYY。多余的Y染色体是由于精细胞有丝分裂时出现不分离的结果，
当其与正常卵子受精，生成XYY核型的受精卵。XYY综合征的确诊应做染色体核型检
查，检查到两条YY染色体或xYY核型时可以确诊。
四、白血病的染色体检查
　　　　随着分子生物学和染色体检测技术的提高，人们发现许多白血病与染色体异常（如染
色体易位、缺失、重排等）有关。研究发现急性髓细胞白血病（ack？te　myeloblastic　leuke—
mia，AMI。）核型异常检出率达93％。这些异常核型多是特异性染色体重排或染色体数目
异常形成，其在病程中较稳定，是可靠的分子标志（表4—10一2）。如AML—M3型，90％
以上患者可见到t（15；17）（q22；q12）的特异性染色体异常，17q上的维A酸a受体
（RARA）和15q上的早幼粒细胞白血病（promyeloblastic　leu。kemia，PML）基因互相易
位，形成PML—RARA及RARA—PMI。两种融合基因，是M3型的特异性分子基因。慢
475
476
舅四蔫。实验一诊颧
性粒细胞白血病（chronic　myeloblastic　leukemia，CML）典型的特点是具有phl染色体，
phl染色体为t（9；22）染色体易位，是9号染色体长臂3区4带处的c—abl易位至22号
染色体长臂1区c—bcr断裂点，易位后重组形成bcr—abl融合基因，其基因产物P210具有
较高的蛋白酪氨酸激酶活性（PTK），现被认为是引起癌变的主要原因。
　　　　以上说明大多数白血病与特异的染色体异常有关，因此白血病特异性分子标志的检测
有助于白血病的诊断及分型（表4—10—2）。
　　　　表4．10…2急性白血病的分型及分子标志
FAB、免疫分型
核型
分子标志
AMI。一M
M2。
M2b
M3
M4E0
　M。
M。
M5。
　　　　M5b
　　　　M。
　　　　M，
T—AI。I。（L1、L2）
B—AI。I。（L。）
　　t（9；22）（q“；q’。）
　　inv（3）（q”；P。。）
　　t（9；22）（q“；q’。）
　　t（6；9）（P”；q“）
　　t／del（12）（P’’～。。）
　　t（8；21）（q”；q。。）
　　t（15；17）（q”；q。。）
　　t（U；17）（q“；q。’）
　　　　t（5；17）
　　inv／del（16）（q。。）
　　t（6；9）（q”；q。‘）
　　　　＋（4）
t（11；19）（q”；P”）
’t（9；11）（P。’～”；q。。）
　　　　t／del（11）（q。。）
　　t（8；16）（P”；P’。）
　　t（3；5）（q”；q。‘）
　　　　Inv／del（3）
t（11；14）（P”；q“）
t（1；14）（P“；q’。）
t（10；14）（q“；q。’）
t（8；14）（q“；q。’）
t（8；14）（q“；q。。）
t（8；22）（q“；q。’）
t（2；8）（P“；P’。）
BCR—ABL（RNA）
BCR—ABL（RNA）
DEK—CAN（RNA）
AMI。1一MTG8（RNA）
PMI。一RARA（RNA）
PI。ZF—RARA（RNA）
NPM—RARA（RNA）
CBF~t—MYHll（RNA）
　　DEK—CAN（RNA）
MLL—ENI。（RNA）
MI，I．一AF9（RNA）
　　MLL（HRX）
RHOM2一TCR8（DNA）
TAI．1一TCR8（DNA）
HOX，。一TCR8（DNA）
MYC—TCR8（DNA）
　　MYC—IgH（DNA）
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　　IgK—MYC（DNA）
（康熙雄）
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