诊断学第七版教材

　　　　【原理】　　凝血酶时间（thrombin　time，TT）是在受检血浆中加入“标准化”凝血酶
溶液，测定开始出现纤维蛋白丝所需的时间。
　　　　【参考值】手工法：16～18s；也可用血液凝固分析仪检测。必须指出本实验需设正
常对照值。受检TT值延长超过正常对照值3s以上为延长。
　　　　【临床意义】TT延长见于低（无）纤维蛋白原血症＇】aypo（a）fmrinogenemia＇和异常
纤维蛋白原血症（dysfibrinogenemia）；血中纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）增高；血中有
肝素或类肝素物质存在（如肝素治疗中、sLE和肝脏疾病等）。TT缩短无临床意义。
　　　　（二）甲苯胺蓝纠正试验或血浆游离肝素时间
　　　　【原理】　　甲苯胺蓝呈碱性，有中和肝素的作用。在凝血酶时间（TT）延长的受检血
浆中加入少量甲苯胺蓝，再测定TT。若延长的TT恢复至正常或明显缩短，则表示受检
血浆中有类肝素物质存在或肝素增多；若不缩短，则表示受检血浆中存在其他抗凝血酶类
物质或缺乏纤维蛋白原。
　　　　【参考值】TT延长的受检血浆中加入甲苯胺蓝后，TT缩短5s以上，提示受检血浆
中有类肝素或肝素物质增多；如果TT不缩短，提示延长的TT不是由肝素类物质所致。
　　　　【临床意义】　　血中类肝素物质增多见于严重肝病、DIC、过敏性休克、使用氮芥类药物、
放疗后、肝叶切除后、肝移植后等。临床应用肝素时，延长的1vr也被甲苯胺蓝纠正。
　　　　（三）APTT交叉试验　　　　APTT延长
　　　　【原理】本试验是用于鉴别凝血因子缺乏或　　　　I
有抗凝物质存在。延长的APTT，若能被1／2量的　　　　，
正常新鲜血浆所纠正，表示受检血浆中可能缺乏凝　　　　’份受检血浆’÷份正常新鲜血浆
血因子；若不能纠正则表示受检血浆中可能存在抗　　　　丫
凝物质（图4—3—2）。　　　　‘u一
　　　　广——————————1
二、病理性抗凝物质的诊断试验　　　　丐常　　　　廷产
　　　　丫　　　　t
　　　　（一）狼疮抗凝物质测定　　　　可能有凝血因子缺乏　　可能存在抗凝物质
　　　　【原理】是一种改良Russell蝰蛇毒稀释试　　　　图4—3—2　APTT交叉纠正试验
验。包括①L。tpo试验Ⅱ：即当蝰蛇毒试验延长时，加入正常血浆后，蝰蛇毒时间仍延长，
提示被检血浆中存在狼疮抗凝物质；②Ltlcol。试验：内含过量脑磷脂以中和狼疮抗凝物
质，从而使凝固时间缩短或正常。
　　　　【参考值】　　凝固法：hapo试验Ⅱ为31～44　s；uJCOI‘试验为30～38　s；Llapo试验Ⅱ／b3C0~‘
试验比值为1．O～1．2。
　　　　【临床意义】本试验阳性见于有狼疮抗凝物质存在的患者，如SLE、自发性流产、某
些血栓性疾病以及抗磷脂抗体综合征等。
　　　　（二）抗心磷脂抗体测定
　　　　【原理】　　抗心磷脂抗体（anti—cardiolipin　antibodies，ACA）是抗磷脂抗体（anti—
phospholipid　antibody，APA）中的一种主要抗体，它的靶抗原主要是血浆中的磷脂结合
蛋白（phospholipid　binding　protein），如＆一糖蛋白I（p2一GPI）和凝血酶原（pro—
thrombin）等。从而导致APA与内皮细胞、血小板膜磷脂结合，引起血管壁受损和血小
板活化等，促进血栓形成。
　　　　【检测结果】阴性。
　　　　【临床意义】　　原发性抗磷脂抗体综合征（anti—phospholipid　antibody　syndrome，
APS），如动／静脉血栓、自发性流产、免疫性溶血等。继发性APS，如SI。E（本试验阳性
率70％～80％）、类风湿关节炎（阳性率33％～49％）、脑血管意外、免疫性血小板减少
和特发性血小板减少性紫癜等。
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三、生理性抗凝因子检测
　　　　（一）血浆抗凝血酶活性测定
　　　　【原理】受检血浆中加入过量凝血酶，使抗凝血酶（antithrombin，AT）与凝血酶形
成1：1复合物，剩余的凝血酶作用于发色底物S一2238，释出显色基团对硝基苯胺
（PNA）。显色的深浅与剩余凝血酶呈正相关，而与AT呈负相关，根据受检者吸光度（A
值）从标准曲线中计算出AT：A的含量。
　　　　【参考值】发色底物法．．108．5％土5．3％。
　　　　【临床意义】
　　　　1．增高　　见于血友病、白血病和再生障碍性贫血等的急性出血期；也见于口服抗凝
药治疗过程中。
　　　　2．减低见于先天性和获得性AT缺陷症，后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIc
和肝脏疾病等。
　　　　（二）血浆蛋白C活性测定
　　　　【原理】　　从蛇毒液中提取的protac为蛋白c（protein　C，PC）特异性的激活剂，被激
活后的PC（即活化蛋白C，APC）作用与特异的发色底物Chron’l（）zym　PCA，释放出对硝
基苯胺（PNA）而显色，显色深浅与Pc：A呈线性关系。
　　　　【参考值】100．24％±13．18％。
　　　　【临床意义】　　PC：A是检测Pc活性的方法之一。PC是一种依赖维生素K的天然抗凝
因子。在凝血酶（T）与凝血酶调节蛋白（TM）复合物（T—TM）的作用下，PC转变为
活化蛋白c（APc），后者灭活因子Ⅷa、V　a和促进纤溶活性，起到抗凝血作用。减低：
遗传性者见于遗传性或先天性PC缺陷症；获得性见于：DIC、肝病、手术后、口服抗凝
剂、急性呼吸窘迫综合征和DIC等。
　　　　（三）血浆游离蛋白S抗原和总蛋白S抗原测定
　　　　【原理】　　总蛋白s（total　protein　S，TPS）抗原包括游离蛋白s（free　protein　S，FPS）
抗原和与补体C4．结合的PS（C4bp—PS）。火箭电泳法是在琼脂板上同时测定TPS和FPs，
即在待测血浆中加入一定量的聚乙二醇6000，则c4bp—PS会沉淀下来，上清部分即
为FPS。
　　　　【参考值】　　免疫火箭电泳法：FPS为100．9％±29．1％；TPs为96．6％土9．8％。
　　　　【临床意义】　　F。PS减低：见于先天性和获得性。PS缺陷症，后者见于肝病、口服抗凝
剂和DIC等。
　　　　（四）血浆凝血酶一抗凝血酶复合物测定
　　　　【原理】用兔抗人凝血酶抗体包被酶标板，加入受检者血浆后再加入辣根过氧化酶标
记的鼠抗人AT抗体，后者使（）PD显色，显色的深浅与受检血浆中所含的凝血酶一抗凝血
酶复合物（thrombin—antithrombin　cornplex，TAT）呈正相关。
　　　　【参考值】　　酶标法：（1．45±O．4）扯g／L。
　　　　【临床意义】本试验是反映凝血酶活性的试验。增高见于急性心肌梗死、不稳定型心
绞痛、DIc、深静脉血栓形成、脑梗死、急性白血病等。
第五节　　纤溶活性检测
　　　　纤维蛋白溶酶（纤溶酶）可将已形成的血凝块加以溶解，产生纤维蛋白（原）的降解
产物，从而反映纤溶活性。纤溶活性增强可致出血，纤溶活性减低可致血栓。
　　　　●
一、筛检试验
　　　　（一）优球蛋白溶解时间　　　　，
　　　　【原理】　　血浆优球蛋白（eugloblllin）组分中含有纤维蛋白原（Fg）、纤溶酶原
（PLG）和组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）等，但不含纤溶酶抑制物（plasmin　inh．bi—
tot’）。受检血浆置于醋酸溶液中，使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，将沉淀的优
球蛋白溶于缓冲液中，再加入适量钙溶液（加钙法）或凝血酶（加酶法），使Fg转变为纤
维蛋白凝块，观察凝块完全溶解所需时间。
　　　　【参考值】加钙法：　　（129．8±41．1）min；加酶法：（157．O士59．1）min。一般认为《
’70rain为异常。
　　　　【临床意义】本试验敏感性低，特异性高。
　　　　1_纤维蛋白凝块在70　min内完全溶解　　表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤
溶亢进，后者常见手术、应激状态、创伤、休克、变态反应、前置胎盘、胎盘早期剥离、
羊水栓塞、恶性肿瘤广泛转移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC和应用溶血栓药（rt—
PA、UK）。
　　　　2．纤维蛋白凝块在超过120　min还不溶解　　表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、
栓性疾病和应用抗纤溶药等。
　　　　（二）D一二聚体定性试验
　　　　【原理】D一二聚体（D—dirner，D—D）是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶
特有的代谢物。抗D—D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上，受体血浆中如果存在D一二聚体，
将产生抗原一抗体反应，胶乳颗粒发生聚集现象。
　　　　【参考值】胶乳颗粒比阴性对照明显粗大者为阳性，正常人为阴性。
　　　　【临床意义】　　D—D阴性是排除深静脉血栓（DVT）和肺血栓栓塞（PE）的重要试验，
阳性也是诊断DIC和观察溶血栓治疗的有用试验。凡有血块形成的出血，本试验均可阳
性，故其特异性低，敏感度高；但在陈旧性血块时，本试验又呈阴性。
　　　　（三）血浆纤维蛋白（原）降解产物定性试验
　　　　【原理】　　于受检血浆中加入血浆纤维蛋白（原）降解产物＇fibrin（agen）degradation
product，FI）Ps＇抗体包被的胶乳颗粒悬液，若血液中FDPs浓度超过或等于5弘g／ml，胶
乳颗粒发生凝集。根据受检血浆的稀释度可以计算出血浆FDPs含量。
　　　　【参考值】胶乳凝集法：阴性。
　　　　【临床意义】　　FDPs阳性或增高见于原发性纤溶（primary　fibrinolysis）和继发性纤溶
（sencondary　fibrinolysis），后者如DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺血栓栓塞、
深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶血栓治疗等。
二、诊断试验
　　　　（一）血浆组织型纤溶酶原激活剂测定
　　　　【原理】血浆优球蛋白含有吸附于纤维蛋白上的组织型纤溶酶原激活剂（tissue—type
plasminogen　actiVator，t—PA），它使PLG转变为纤溶酶（PL），PI。可使发色底物
（s一2251）释出对硝基苯胺（PNA）而显色，显色的深浅与受检血浆中t—PA含量呈正相
关。所测得的A值，可从标准曲线计算受检血浆中t—PA：A含量。
　　【参考值】发伊底物法1　0．3～O．6活化单仲／m1．
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鋈溱谶戮瞩糕麟　　｜囔jjj然虹鳓急吟
　　　　【临床意义】
　　　　1．增高　　表明纤溶活性亢进，见于原发性纤溶和继发性纤溶（如DIC）等。
　　　　2．减低表明纤溶活性减弱，见于血栓前状态和血栓性疾病，如动脉血栓形成、深
静脉血栓形成、高脂血症、口服避孕药、缺血性脑卒中和糖尿病等。
　　　　（二）血浆纤溶酶原活性测定
　　　　【原理】受检血浆中加链激酶（SK）和发色底物（S一2251），受检血浆中的血浆纤
溶酶原活性（plasminogen，PLG）在SK的作用下，转变成纤溶酶（PL），后者作用于发
色底物，释出对硝基苯胺（PNA）而显色。显色的深浅与纤溶酶的水平呈正相关，通过计
算求得血浆中PLG：A的含量。
　　　　【参考值】发色底物法：75％～140％。
　　　　【临床意义】
　　　　1．PLG：A增高　　表示纤溶活性减低，见于血栓前状态和血栓性疾病。
　　　　2．PLG：A减低　　表示纤溶活性增高，见于原发性纤溶、继发性纤溶和先天性PLG缺
乏症。
　　　　（三）血浆纤溶酶原激活抑制物一1活性测定
　　　　【原理】　　受检血浆中加入纤溶酶原激活剂（PA）和PLG，血浆中的PAI一1与PA形
成复合物，剩余的PA使PLG转变成PL，PL作用于发色底物，释出PNA而显色，其颜
色的深浅与PL的活性呈正相关；而血浆中PL与纤溶酶原激活抑制物一1活性（plasmino—
gen　actiVator　inhibitor—l，PAI一1）呈负相关，从所测得的A值，可计算出血浆中PAI一
1：A的水平。
　　　　【参考值】发色底物法：O．1～1．O抑制单位／ml。
　　　　【临床意义】
　　　　1．PAI一1增高　　表示纤溶活性减低，见于血栓前状态和血栓性疾病。
　　　　2．PAI一1减低　　表示纤溶活性增高，见于原发性和继发性纤溶。
　　　　（四）血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasma　protamine　pai．ac